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小鼠腎成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基說明書

簡要描述:

小鼠腎成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基說明書售后:收到細(xì)胞后12天,如發(fā)現(xiàn)細(xì)胞有質(zhì)量問題(如污染,死亡,快遞運(yùn)輸?shù)仍颍r,應(yīng)出具書面質(zhì)量問題報(bào)告并及時傳真或E-mail致銷售人員,我們將盡快為您解決!

更新時間:2018-11-09

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小鼠腎成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基說明書

小鼠腎成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基說明書訂購流程:
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產(chǎn)品名稱

小鼠腎成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基說明書

英文名稱

Mouse kidney fibroblast medium

規(guī)格 

100mL


(1)       血管平滑肌細(xì)胞的再生能力是原發(fā)血管病變的重要因素。
(2)       表達(dá)鈣通道及ICAM-1和VCAM-1,參與血管壁的炎癥反應(yīng)。
(3)       與血管疾病的進(jìn)展和穩(wěn)定有關(guān)。
 生理變化:
(1)       主動脈硬化。
(2)       主動脈瘤
(3)       主動脈鈣化。
基本特性:
(1)       組織來源于正常大鼠大動脈組織。
(2)       鑒定:肌動蛋白,alpha-SMA和Desmin免疫熒光染色。
(3)       原代細(xì)胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
(4)       每凍存管細(xì)胞數(shù):>5×105 cells/1ml。
(5)       肌動蛋白,alpha-SMA和Desmin免疫熒光染色驗(yàn)證。
(6)       不含有HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。


0.312-20 ng/mL人白細(xì)胞抗原B27(HLA-B27)ELISA試劑盒

0.312-20 ng/mLELISA Kit for Human HLA class I histocompatibility antigen, B-27 alpha chain

0.156-10 ng/mL人低氧誘導(dǎo)因子1α(HIF-1α)ELISA試劑盒

0.156-10 ng/mLELISA Kit for Human Hypoxia-inducible factor 1-alpha

0.156-10 ng/mL人高遷移率族蛋白B1(HMGB-1)ELISA試劑盒

0.156-10 ng/mLELISA Kit for Human High mobility group protein B1

0.78-50 ng/mL高香草酸(Homovanillic acid)ELISA試劑盒

0.78-50 ng/mLELISA Kit for Homovanillic acid
小鼠腎成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基說明書15.6-1000 pg/mL人間白素結(jié)合因子(ILF3)ELISA試劑盒

15.6-1000 pg/mLELISA Kit for Human Interleukin enhancer-binding factor 3

15.6-1000 pg/mL人整合素β1,ITG β1 ELISA試劑盒

15.6-1000 pg/mLELISA Kit for Human Integrin beta-1

31.2-2000 pg/mL人白介素1家族成員9(IL1F9)ELISA試劑盒

31.2-2000 pg/mLELISA Kit for Human Interleukin-36 gamma

0.312-20 ng/mL人白介素7受體α亞基(IL-7RA)ELISA試劑盒

0.312-20 ng/mLELISA Kit for Human Interleukin-7 receptor subunit alpha
小鼠腎成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基說明書運(yùn)輸和保存:
視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng),如無法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作,凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請鏡下觀察細(xì)胞生長狀態(tài),如鋪瓶率超過85%請立即進(jìn)行傳代操作,如懸浮的細(xì)胞較多,請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
操作流程:
1.1 主要試劑與儀器:倒置相差顯微鏡(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存:
1.2.1 細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細(xì)胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細(xì)胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液(37℃預(yù)熱,8~10倍體積)離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細(xì)胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內(nèi),在37℃、5%co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細(xì)胞傳代 原代培養(yǎng)的hek-293細(xì)胞48h換液1次,細(xì)胞長至60%~70%融合時,用0.25%胰酶消化1~2min,將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細(xì)胞脫壁、懸浮、分散,為使細(xì)胞進(jìn)一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,獲得細(xì)胞懸液,然后加入倍量的培養(yǎng)基,溫和混勻,吸管分裝混合液,傳代擴(kuò)增細(xì)胞。
1.3 細(xì)胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細(xì)胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細(xì)胞的計(jì)數(shù) 常規(guī)消化細(xì)胞,待細(xì)胞變圓、脫壁并浮起,加入少量培養(yǎng)基離心,再用pbs重懸并吹打制成細(xì)胞懸液。在細(xì)胞計(jì)數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細(xì)胞懸液,用10×物鏡觀察計(jì)數(shù)板四角大方格細(xì)胞數(shù),按公式計(jì)算出細(xì)胞數(shù)。細(xì)胞數(shù)/ml原液=(四方格細(xì)胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細(xì)胞的貼壁率 指數(shù)生長期的細(xì)胞,以0.25%胰酶消化成單細(xì)胞懸液,計(jì)數(shù)后分別接種于12個25cm2培養(yǎng)瓶中,每兩小時隨機(jī)取出3瓶細(xì)胞,吸除培養(yǎng)基及未貼壁細(xì)胞,加入胰消化酶消化、計(jì)數(shù)已貼壁細(xì)胞,取其平均值,按照公式:貼壁率(%)=(已貼壁細(xì)胞數(shù)/接種細(xì)胞數(shù)) ×100%,計(jì)算貼壁率。 
1.6 生長曲線 取指數(shù)生長期的細(xì)胞用胰酶消化制成單細(xì)胞懸液,以1×104/孔接種于24孔板,每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機(jī)取3孔,計(jì)數(shù)每孔細(xì)胞的數(shù)目并計(jì)算平均值。連續(xù)計(jì)數(shù)10d,繪制細(xì)胞生長曲線

 

 

 

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